1.药物成分分离透析法
透析法是利用小分子物质在溶液中可通过半透膜,而大分子物质不能通过半透膜的性质,达到分离的方法。
透析膜的膜孔有大有小,要根据欲分离成分的具体情况而选择。
透析膜有动物性膜、火棉胶膜、羊皮纸膜(硫酸纸膜)、蛋白质胶膜、玻璃纸膜等。由常多用市售的玻璃纸或动物性半透膜扎成袋状,外面用尼龙网袋加以保护,小心加入欲透析的样品溶液,悬挂在清水容器中。经常更换清水使透析膜内外溶液的浓度差加大,必要时适当加热,并加以搅拌,以利透析速度加快。为了加快透析速度,还可应用电透析法,即在半在半透膜旁边纯溶剂两端放置二个电极,接通电路,则透析膜中的带有正电荷的成分如无机阳离子、生物碱等向阴极移动,而带负电共荷的成分如无机阴离子、有机酸等则向阳极移动,中性化合物及高分子化合物则留在透析膜中。透析是否完全,须取透析膜内溶液进行定性反应检查。
一般透析膜可以自制:动物半透膜如猪、牛的膀胱膜、用水洗净,再以乙醚脱脂,即可供用;羊皮纸膜可将滤纸浸入50%的硫酸15~60分钟,取出铺在板上,以水冲洗制得。其膜孔大小与硫酸浓度、浸泡时间以及用水冲洗速度有关;火棉胶膜系将火棉胶溶于乙醚及无水乙醇,涂在板上,干后放置水中即可供用,其膜孔大小与溶剂种类、溶剂挥发速度有关,溶剂中加入适量水可使膜孔增大,加入少量醋酸可使膜孔缩小;蛋白质胶(明胶)膜可用20%明胶涂于细布上,阴干后放水中,再加甲醛使膜凝固,冲洗干净即可供用。近来商品有透析膜管成品出售,国外习称“ViskingDialysisTubing”,有各种大小厚度规格,可供不同大小分子量的多糖、多肽透析时选用。
2.药物分析之硒、氟及硫化物杂质的检查法
(1)氧瓶燃烧法(Oxygen Flask Combustion Method):系将有机物放入充满氧气的密闭燃烧瓶中燃烧,产生的组分用吸收液吸收后再选用合适的方法进行鉴别、检查或含量测定。适用于可与环状结构中碳原子以共价键相结合的含卤素、硫、硒等的有机药物,特点是简便、快速、破坏完全,尤其适用于微量样品的分析。
(2)硒检查法:元素状态的硒无毒,但硒化物有剧毒。有机药物用氧瓶燃烧法进行有机破坏,硒成为高价氧化物(SeO3),被硝酸溶液吸收,再用盐酸羟胺将Se6+还原为Se4+,在pH2.0±2的条件下,加二氨基萘试液反应100分钟,生成4,5-苯并苯硒二唑(4,5-Benzopiazselenol),用环己烷提取后在378nm波长处测定吸收度,应不得大于对照液的吸收度。
(3)氟检查法:系用于检查有机氟化物中氟的含量。有机氟经氧瓶燃烧分解产生氟化氢,用水吸收,另在pH4.3时茜素氟蓝与硝酸亚铈以1:
结合成红色配位化合物,当有F-存在时,三者以1:1:1结合成蓝紫色配位化合物,在暗处放置1小时,置2cm吸收池中,于610nm波长处测定吸收度,并用空白试验进行校正。根据氟对照液在相同显色条件下所得吸收度,计算有机氟化物中氟的含量。
(4)硫化物检查法:硫化物与盐酸作用产生硫化氢气体,遇醋酸铅试纸产生棕色的硫化铅“硫斑”,与一定量标准硫化钠溶液在相同条件下生成的硫斑比较。
3.阿莫西林
(1)鉴别:HPLC、红外光谱法
(2)检查
①有关物质:主要是降解产物。采用HPLC法,由于种类多、极性差异大,采用梯度洗脱法。
②聚合物:分子排阻色谱法检查
③水分 含3分子结晶水,按费休法测定含水应为12.0~15.0%
(3)含量测定
高效液相色谱法,外标法计算含量。
4.甾体激素类药物特点
甾体激素类药物分为肾上腺皮质激素、雄性激素及蛋白同化激素、孕激素、雌激素等。
(1)肾上腺皮质激素
结构特点:有21个C原子;A环,具有Δ4-3-酮; C17有α-醇酮基,并多数为α-羟基;C10、C13,有角甲基;C11,有羟基
(2)雄性激素
结构特点:A环,具有Δ4-3-酮;C17,无侧链是一个β-羟基形成的酯
(3)孕激素
结构特点:有21个C原子;A环,具有Δ4-3-酮; C17,有甲酮基
(4)雌激素
结构特点:具有18个C原子; A环,为苯环;C3有酚羟基;C10,无角甲基;C17,有β-羟基。
5.奋乃静的鉴别与含量测定
鉴别
(1)氧化反应 被过氧化氢氧化呈深红色。
(2)外吸收光谱。
奋乃静在258nm8有最大吸收,吸收度约为0.65.
(3)红外光谱法。
含量测定
(1)原料药:非水滴定法。
(2)片剂:紫外分光光度法,对照品比较法计算含量。
(3)注射剂:萃取后非水滴定法。
由于溶剂水对测定有干扰,所以加氢氧化钠试液碱化后,用氯仿提取药物,挥干氯仿,照原料药方法测定。
6.盐酸四环素鉴别
(1)三氯化铁反应:具酚羟基和烯醇结构,与铁离子形成红色配合物
(2)高效液相色谱法 供试品与对照品保留时间一致。
(3)红外分光光度法 测定最大吸收波长和相应吸收度。
(4)氯化物鉴别反应。
7.挥发性有机杂质测定方法
(1)面积归一化法:计算各杂质峰面积及其总和,并求出占总峰面积的百分率,但溶剂峰不计算在内。
(2)主成分自身对照法:先按供试品规定的杂质限度,将供试品稀释成一定浓度的溶液,作为对照溶液,进样,调节检测器的灵敏度或进样量,使对照溶液中的主成分色谱面积满足准确测量要求。然后取供试品溶液,进样,记录时间,一般应为主成分保留时间的倍数。根据测得的供试品溶液的各杂质峰面积及其总和并与对照溶液主成分的峰面积比较,计算杂质限度。
(3)内标法测定杂质总量限度:供试品按各品种项下规定的方法配制不含内标物质的供试品溶液,注入仪器,记录色谱图I;再配制含有内标物质的供试品溶液,同法记录色谱图II.如果图I中没有与图II上内标峰保留时间相同的杂质峰,则图II中各杂质面积之和应小于内标物质峰面积(溶剂峰不计在内)。
(4)内标法加校正因子测定供试品中某个杂质(或主成分)含量。
(5)外标法测定供试品中某个杂质(或主成分)含量。
8.地西泮制剂分析
片剂
(1)检查
有关物质:薄层色谱,溶液自身稀释对照法,限量0.5%
含量均匀度:紫外分光光度法,284nm。
溶出度:紫外分光光度法,242nm测定,吸收系数大,灵敏度更高。
含量测定:紫外分光光度法,284nm 。
(2)注射液
有关物质:HPLC,主成分自身对照法。
含量测定:地西泮注射液处方中苯甲酸、苯甲酸钠等附加剂有干扰,用HPLC法。此法操作简便、可消除干扰。
9.丙戊酸钠药物的相互作用汇总
(1)饮酒可加重镇静作用。
(2)全麻药或中枢神经抑制药与丙戊酸合用,前者的临床效应可更明显。
(3)与抗凝药如华法林或肝素等,以及溶血栓药合用,出血的危险性增加。
(4)与阿司匹林或双嘧达莫合用,可由于减少血小板凝聚而延长出血时间。
(5)与苯巴比妥类合用,后者的代谢减慢,血药浓度上升,因而增加镇静作用而导致嗜睡。
(6)与扑米酮合用,也可引起血药浓度升高,导致中毒,必要时需减少扑米酮的用量。
(7)与氯硝西泮合用防止失神发作时,曾有报道少数病例反而诱发失神状态。
(8)与苯妥英合用时,因与蛋白结合的竞争可使两者的血药浓度发生改变,由于苯妥英浓度变化较大,需经常测定。但是否需要调整剂量应视临床情况与血药浓度而定。
(9)与卡马西平合用,由于肝酶的诱导而致药物代谢加速,可使二者的血药浓度和半衰期降低,故须监测血药浓度以决定是否需要调整用量。
(10)与对肝脏有毒性的药物合用时,有潜在肝脏中毒的危险。有肝病史者长期应用须经常检查肝功能。
(11)与氟哌啶醇、洛沙平(loxapine)、马普替林(maprotiline)、单胺氧化酶抑制药、吩噻嗪类、噻吨类和三环类抗抑郁药合用,可以增加中枢神经系统的抑制,降低惊厥阈和丙戊酸的效应,须及时调整用量以控制发作。
10.药物丙戊酸钠的不良反应
(1)常见不良反应表现为腹泻、消化不良、恶心、呕吐、胃肠道痉挛、可引起月经周期改变。
(2)较少见短暂的脱发、便秘、倦睡、眩晕、疲乏、头痛、共济失调、轻微震颤、异常兴奋、不安和烦躁。
(3)长期服用偶见胰腺炎及急性肝坏死。
(4)可使血小板减少引起紫癜、出血和出血时间延长,应定期检查血相。
(5)对肝功能有损害,引起血清碱性磷酸酶和氨基转移酶升高,服用2个月要检查肝功能。
(6)偶有过敏。
(7)偶有听力下降和可逆性听力损坏。

