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作者:易小考 来源:易小考官网 15136人阅读

1.血清与血浆的区别

血清=全血+离心(分离出的淡黄色液体)

血浆=全血+抗凝剂+离心(分离出的淡黄色液体)。

血清与血浆的区别记忆口诀:血浆抗凝出凝血,血清清白缺因子。

血液由血细胞(红细胞、白细胞、血小板)和血浆组成。离体后的血液自然凝固,分离出来的淡黄色透明液体称为血清。血液加抗凝剂后分离出来的淡黄色液体称为血浆。血清与血浆的差别是:血清缺少某些凝血因子,如凝血因子Ⅰ(纤维蛋白原)、Ⅱ(凝血酶原)、Ⅴ、Ⅷ等。

全血适用于临床血液学检查,如血细胞计数、分类和形态学检查等。血浆适用于血浆生理性和病理性化学成分的测定,特别是内分泌激素测定;血浆除钙离子外,含有其他全部凝血因子,也适用于血栓与止血的检查。血清适用于临床化学和临床免疫学检查。

2.常用抗凝剂和使用方法

(1)常用抗凝剂和使用方法:

①乙二胺四乙酸(EDTA)盐:常用有钠盐或钾盐,能与血液中钙离子结合成螯合物,使Ca2+失去凝血作用,阻止血液凝固。

EDTA盐对血细胞形态、血小板计数影响很小,适用于血液学检查,尤其是血小板计数。

根据国际血液学标准化委员会(ICSH)建议,CBC抗凝剂用EDTA-K2•2H2O,量为1.5~2.2mg/ml血液。不适于凝血检查、血小板功能试验。

②草酸盐:常用有草酸钠、草酸钾、草酸铵,溶解后解离的草酸根离子能与样本中钙离子形成草酸钙沉淀,使Ca2+失去凝血作用,阻止血液凝固。草酸盐不适于凝血检查。

双草酸盐抗凝剂:草酸钾可使红细胞体积缩小,草酸铵则可使红细胞胀大,两者按适当比例混合,恰好不影响红细胞形态和体积,可用于血细胞比容、CBC、网织红细胞计数等项目检查。双草酸盐抗凝剂可使血小板聚集、影响白细胞形态,不适于血小板计数、白细胞分类计数。

③肝素:加强抗凝血酶(AT)灭活丝氨酸蛋白酶作用,阻止凝血酶的形成,并阻止血小板聚集等作用,从而阻止血液凝固。肝素是红细胞渗透脆性试验的理想抗凝剂。但肝素可引起白细胞聚集,瑞氏染色后产生蓝色背景,不适于CBC、细胞形态学检查。

④枸橼酸盐:常用有枸橼酸钠,能与血液中钙离子结合形成螯合物,阻止血液凝固。枸橼酸钠与血液的抗凝比例为1:9或1:4。适用于红细胞沉降率、凝血检查,是输血保养液的成分。

3.瑞氏染色法

(1)瑞氏染料:由酸性染料伊红(E)和碱性染料亚甲蓝(M+)组成。伊红通常为钠盐,有色部分为阴离子。亚甲蓝(又称美蓝)为四甲基硫堇染料,有对醌型和邻醌型两种结构。通常为氯盐,即氯化美蓝,有色部分为阳离子。美蓝容易氧化为一、二、三甲基硫堇等次级染料(即天青)。将适量伊红、美蓝溶解在甲醇中,即为瑞氏染料。甲醇的作用:一是溶解美蓝和伊红;二是固定细胞形态。

(2)染色原理既有物理的吸附作用,又有化学的亲和作用。各种细胞成分化学性质不同,对各种染料的亲和力也不一样。如血红蛋白、嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染紫蓝色或蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫红色,称为嗜中性物质;原始红细胞、早幼红细胞胞质、核仁含较多酸性物质,染成较浓厚的蓝色;中幼红细胞既含酸性物质,又含碱性物质,染成红蓝色或灰红色;完全成熟红细胞,酸性物质彻底消失后,染成粉红色。

(3)pH值的影响:细胞各种成分均属蛋白质,由于蛋白质系两性电解质,所带电荷随溶液pH而定,在偏酸性环境中正电荷增多,易与伊红结合,红细胞和嗜酸性粒细胞染色偏红,细胞核呈淡蓝色或不染色;在偏碱性环境中负电荷增多,易与美蓝结合,所有细胞呈灰蓝色,颗粒呈深暗,嗜酸性颗粒呈暗褐,甚至棕黑色,中性颗粒偏粗,呈紫黑色。稀释染液必须用缓冲液,冲洗用水应近中性,否则可导致细胞染色反应呈色异常,形态难以识别,甚至错误。

4.红细胞平均指数

(1)检测原理红细胞平均指数包括:红细胞平均体积(MCV),每个红细胞平均体积的大小,以飞升(fl)为单位;红细胞平均血红蛋白含量(MCH),即每个红细胞内平均所含血红蛋白的量,以皮克(pg)为单位;红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC),即平均每升红细胞中所含血红蛋白量,以g/L为单位。

(2)方法学评价

1.MCV 当红细胞凝集(如冷凝集综合征)、严重高血糖症可使MCV假性增高。

2.MCH 高脂血症、白细胞增多症可使MCH假性增高。

3.MCHC 受Hct(血浆残留或出现异常红细胞)和Hb(高脂血症、白细胞增多症)的影响。

(3)质量控制

①手工法 红细胞计数、血红蛋白、血细胞比容测定数据必须准确可靠。

②血液分析仪法 利用人群红细胞平均指数相当稳定的原理,用XB分析法或浮动均值法对血液分析仪进行质量控制。

(4)参考值

不同人群红细胞指数的参考范围


MCV(fl)

MCH(pg)

MCHC(g/L)

新生儿

86~120

27~36

250~370

成人

80~100

26~34

320~360

 

(5)临床意义 红细胞平均指数可作为贫血形态学分类依据

贫血的红细胞形态学分类

贫血分类

MCV

MCH

MCHC

贫血

正细胞贫血

正常

正常

正常

再生障碍性贫血、急性失血性贫血、某些溶血性贫血

大细胞贫血

 

增高

增高

正常

各种造血物质缺乏或利用不良的贫血

单纯小细胞贫血

减低

减低

正常

慢性感染、慢性肝肾疾病性贫血

小细胞低色素贫血

减低

减低

减低

缺铁性贫血及铁利用不良贫血,慢性失血性贫血

 

4.血液保存液种类、主要成分及作用

(1)血液保存液常用种类:配方可分为:ACD(A,枸橼酸;C,枸橼酸三钠;D,葡萄糖)与CPD(C,枸橼酸三钠;P,磷酸盐;D,葡萄糖及枸橼酸)两大类保存液。在CPD中加腺嘌呤即为CPDA-1。

(2)血液保存液的主要成分及作用:

①枸橼酸盐:是所有抗凝保存液中的基本抗凝物质。最常用的是枸橼酸三钠,除抗凝作用外,它还能阻止溶血的发生。

②枸橼酸:避免保存液中的葡萄糖在消毒中焦化。

③葡萄糖:是红细胞代谢所必需的营养成分,可延长红细胞保存时间,且防止溶血;并减慢细胞中有机磷的消失,防止红细胞储存损伤。

④腺嘌呤:可促进红细胞ATP合成,延长红细胞的保存期(达35d),并增强红细胞放氧功能。

⑤磷酸盐:提高保存液pH,延长红细胞的保存期。ACD液pH较低,对保存红细胞不利,只能保存21d,且放氧能力迅速下降。CPD保存液中加入腺嘌呤与磷酸,从而延长红细胞的生存期。

5.交叉配血法:主侧加受血者血清与供血者红细胞;次侧加受血者红细胞与供血者血清,观察两者是否出现凝集。

6.ABO血型鉴定的正反定型:

①正向定型:用已知抗体的标准血清检查红细胞上未知的抗原。

②反向定型:用已知血型的标准红细胞检查血清中未知的抗体。

7.血液保存液常用种类:配方可分为:ACD(A,枸橼酸;C,枸橼酸三钠;D,葡萄糖)与CPD(C,枸橼酸三钠;P,磷酸盐;D,葡萄糖及枸橼酸)两大类保存液。在CPD中加腺嘌呤即为CPDA-1。

8.成分输血的优点:①疗效高:将血液成分提纯、浓缩而得到高效价的制品。②反应少:可减少输全血引起各种不良的抗原抗体的免疫反应。③合理用血液成分:将全血分离制成不同的细胞及血浆蛋白成分,供不同目的应用。④经济:既可节省宝贵的血液,又可减低患者的医疗费用。

9.尿标本保存常用的防腐剂:

①甲醛:又称福尔马林。对尿细胞、管型等有形成分的形态结构有较好的固定作用。

②甲苯:可在尿标本表面形成一层薄膜,阻止尿中化学成分与空气接触。常用于尿糖、尿蛋白等化学成分的定性或定量检查。

③麝香草酚:可抑制细菌生长,保存尿有形成分,用于尿显微镜检查、尿浓缩结核杆菌检查,以及化学成分保存。

④浓盐酸:用作定量测定尿17-羟、17-酮、肾上腺素、儿茶酚胺、Ca2+等标本防腐。

⑤冰乙酸:用于检测尿5-羟色胺、醛固酮等的尿防腐。

⑥戊二醛:用于尿沉淀物的固定和防腐。

10.多尿、少尿和无尿的定义:

①多尿指24h尿总量成人超过2500ml者,儿童超过3L者。

②少尿指24h尿量少于400ml。

③无尿指尿量<100ml/24h。

11.肉眼血尿和镜下血尿的定义:

①肉眼血尿:当每升尿含血量达到或者超过1ml时,尿呈淡红色、洗肉水样,雾状或云雾状,外观混浊。

②镜下血尿:尿经离心沉淀镜检时发现红细胞数>3/HP。

12.尿三杯试验:如血尿以第一杯为主,多为尿道出血;以第三杯为主,多为膀胱出血;如三杯均有血尿,多见于肾脏或输尿管出血。

13.乳糜尿产生的机制:

①泌尿系淋巴管破裂:多因淋巴循环受阻,从肠道吸收的乳糜液,逆流进入泌尿系统淋巴管,致使淋巴管内压不断增高而破裂,淋巴液进入尿中所致。

②深部淋巴管阻塞:乳糜液不能流入乳糜池,而逆流到泌尿系统淋巴管所致。


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