血清与血浆的区别
【复习攻略】首先分清什么是血清，什么是血浆。
血清=全血+离心(分离出的淡黄色液体)
血浆=全血+抗凝剂+离心(分离出的淡黄色液体)。
血清与血浆的区别记忆口诀：血浆抗凝出凝血，血清清白缺因子。
血液由血细胞(红细胞、白细胞、血小板)和血浆组成。离体后的血液自然凝固，分离出来的淡黄色透明液体称为血清。血液加抗凝剂后分离出来的淡黄色液体称为血浆。血清与血浆的差别是：血清缺少某些凝血因子，如凝血因子Ⅰ(纤维蛋白原)、Ⅱ(凝血酶原)、Ⅴ、Ⅷ等。
全血适用于临床血液学检查，如血细胞计数、分类和形态学检查等。血浆适用于血浆生理性和病理性化学成分的测定，特别是内分泌激素测定;血浆除钙离子外，含有其他全部凝血因子，也适用于血栓与止血的检查。血清适用于临床化学和临床免疫学检查。
常用抗凝剂和使用方法：
(1)乙二胺四乙酸(EDTA)盐：常用有钠盐或钾盐，能与血液中钙离子结合成螯合物，使Ca2+失去凝血作用，阻止血液凝固。
EDTA盐对血细胞形态、血小板计数影响很小，适用于血液学检查，尤其是血小板计数。
根据国际血液学标准化委员会(ICSH)建议，CBC抗凝剂用EDTA-K2•2H2O，量为1.5～2.2mg/ml血液。不适于凝血检查、血小板功能试验。
(2)草酸盐：常用有草酸钠、草酸钾、草酸铵，溶解后解离的草酸根离子能与样本中钙离子形成草酸钙沉淀，使Ca2+失去凝血作用，阻止血液凝固。草酸盐不适于凝血检查。
双草酸盐抗凝剂：草酸钾可使红细胞体积缩小，草酸铵则可使红细胞胀大，两者按适当比例混合，恰好不影响红细胞形态和体积，可用于血细胞比容、CBC、网织红细胞计数等项目检查。双草酸盐抗凝剂可使血小板聚集、影响白细胞形态，不适于血小板计数、白细胞分类计数。
(3)肝素：加强抗凝血酶(AT)灭活丝氨酸蛋白酶作用，阻止凝血酶的形成，并阻止血小板聚集等作用，从而阻止血液凝固。肝素是红细胞渗透脆性试验的理想抗凝剂。但肝素可引起白细胞聚集，瑞氏染色后产生蓝色背景，不适于CBC、细胞形态学检查。
(4)枸橼酸盐：常用有枸橼酸钠，能与血液中钙离子结合形成螯合物，阻止血液凝固。枸橼酸钠与血液的抗凝比例为1:9或1:4。适用于红细胞沉降率、凝血检查，是输血保养液的成分。
瑞氏染色法：
1.瑞氏染料：由酸性染料伊红(E)和碱性染料亚甲蓝(M+)组成。伊红通常为钠盐，有色部分为阴离子。亚甲蓝(又称美蓝)为四甲基硫堇染料，有对醌型和邻醌型两种结构。通常为氯盐，即氯化美蓝，有色部分为阳离子。美蓝容易氧化为一、二、三甲基硫堇等次级染料(即天青)。将适量伊红、美蓝溶解在甲醇中，即为瑞氏染料。甲醇的作用：一是溶解美蓝和伊红;二是固定细胞形态。
2.染色原理既有物理的吸附作用，又有化学的亲和作用。各种细胞成分化学性质不同，对各种染料的亲和力也不一样。如血红蛋白、嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结合，染粉红色，称为嗜酸性物质;细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质为酸性，与碱性染料美蓝或天青结合，染紫蓝色或蓝色，称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合，染淡紫红色，称为嗜中性物质;原始红细胞、早幼红细胞胞质、核仁含较多酸性物质，染成较浓厚的蓝色;中幼红细胞既含酸性物质，又含碱性物质，染成红蓝色或灰红色;完全成熟红细胞，酸性物质彻底消失后，染成粉红色。
3.pH值的影响：细胞各种成分均属蛋白质，由于蛋白质系两性电解质，所带电荷随溶液pH而定，在偏酸性环境中正电荷增多，易与伊红结合，红细胞和嗜酸性粒细胞染色偏红，细胞核呈淡蓝色或不染色;在偏碱性环境中负电荷增多，易与美蓝结合，所有细胞呈灰蓝色，颗粒呈深暗，嗜酸性颗粒呈暗褐，甚至棕黑色，中性颗粒偏粗，呈紫黑色。稀释染液必须用缓冲液，冲洗用水应近中性，否则可导致细胞染色反应呈色异常，形态难以识别，甚至错误。
