【红细胞酶缺陷检验】
1.高铁血红蛋白还原试验的原理
在血液中加入亚硝酸盐使红细胞中的亚铁血红蛋白变成高铁血红蛋白，正常红细胞的G-6-PD催化戊糖旁路使NADP(氧化型辅酶Ⅱ)变成NADPH(还原型辅酶Ⅱ)，其脱的氢通过亚甲蓝试剂的递氢作用而使高铁血红蛋白(Fe3+)还原成亚铁血红蛋白(Fe2+)，通过比色可观察还原的多少。当G-6-PD缺乏时，高铁血红蛋白还原率下降。
高铁血红蛋白还原试验的参考值和临床意义
（1）参考值：正常人高铁血红蛋白还原率>75%(脐带血≥77%)。
（2）临床意义：
G-6-PD缺乏时，高铁血红蛋白还原率下降。中间缺乏(杂合子)为31%～74%，严重缺乏(半合子或纯合子)<30%。
2.变性珠蛋白小体检查的原理
（1）原理：G-6-PD缺乏的病人血样加入乙酰苯肼于37℃孵育2～4小时，用煌焦油蓝染色观察红细胞中珠蛋白小体的生成情况，计算含5个及以上珠蛋白小体的红细胞的百分率。
变性珠蛋白小体检查的参考值和临床意义
（2）参考值：正常人含5个及以上珠蛋白小体的红细胞一般<30%。
（3）临床意义：G-6-PD缺乏症常高于45%，故可作为G-6-PD缺乏的筛检试验。但还原型谷胱甘肽缺乏症也增高;不稳定血红蛋白病含小体的细胞百分率为75%～84%，HbH病和化学物质中毒时也增高。
3.G-6-PD测定的原理
（1）G-6-PD测定：包括荧光斑点试验和G-6-PD活性检测。
（2）原理：在G-6-PD和NADP+存在下，G-6-PD能使NADP+还原成NADPH，后者在紫外线照射下会发出荧光。NADPH的吸收峰在波长340nm处，可通过单位时间生成的NADPH的量来测定G-6-PD活性。
（3）G-6-PD测定的参考值参考值：
正常人有很强荧光。正常人酶活性为(4.97±1.43)U/gHb。
（4）临床意义：G-6-PD缺陷者荧光很弱或无荧光;杂合子或某些G-6-PD变异者则可能有轻到中度荧光。G-6-PD缺乏者酶活性减少。
【丙酮酸激酶测定的原理】
1.在二磷酸腺苷(ADP)存在的条件下丙酮酸激酶(PK)催化磷酸烯醇丙酮酸(PEP)转化成丙酮酸，在辅酶Ⅰ还原型(NADH)存在情况下，丙酮酸被LDH转化为乳酸，若标记荧光于NADH上，此时有荧光的NADH变为无荧光的NAD。
（1）参考值：正常荧光在20min内消失。(15.0±1.99)U/gHb(37℃)(ICSH推荐Blume法)。
（2）临床意义：PK严重缺乏者荧光60min不消失;PK中间缺乏时荧光25～60min消失。纯合子PK值在正常活性到25%以下，杂合子为正常25%～50%。
【珠蛋白合成异常检验】
1.血红蛋白电泳
（1）原理：
根据不同的血红蛋白带有不同的电荷，等电点不同，在一定的pH缓冲液中，缓冲液的pH大于Hb的等电点时其带负电荷，电泳时在电场中向阳极泳动，反之，Hb带正电荷向阴极泳动。经一定电压和时间的电泳，不同的血红蛋白所带电荷不同、相对分子质量不同，其泳动方向和速度不同，可分离出各自的区带，同时对电泳出的各区带进行电泳扫描，可进行各种血红蛋白的定量分析。
（2）血红蛋白电泳的参考值
pH8.6TEB缓冲液醋酸纤维膜电泳，正常血红蛋白电泳区带：HbA>95%、HbF<2%、HbA2为1.0%～3.1%。pH8.6TEB缓冲液适合于检出HbA、HbA2、HbS、HbC，但HbF不易与HbA分开，HbH与HbBarts不能分开和显示，应再选择其他缓冲液进行电泳分离。
pH6.5TEB缓冲液醋酸纤维膜电泳，主要用于HbH和HbBarts的检出。HbH等电点为5.6，在pH6.5TEB缓冲液中电泳时泳向阳极，HbBarts则在点样点不动，而其余的血红蛋白都向阴极移动。
（3）血红蛋白电泳的临床意义
通过与正常人的血红蛋白电泳图谱进行比较，可发现异常血红蛋白区带，如HbH、HbE、HbBarts、HbS、HbD和HbC等。
HbA2增多，见于β珠蛋白合成障碍性贫血，为杂合子的重要实验室诊断指标。HbE病时也在HbA2区带位置处增加，但含量很大(在10%以上)。HbA2轻度增加亦可见于肝病、肿瘤和某些血液病。
2.抗碱血红蛋白检测
（1）抗碱血红蛋白测定原理又称碱变性试验。胎儿血红蛋白(HbF)具有抗碱和抗酸作用。其抗碱作用比HbA更强。将待检的溶血液与一定量的NaOH溶液混合，作用1分钟后加入半饱和硫酸铵中止碱变性反应。HbF抗碱变性作用强，没有变性存在于上清液中，HbA变性沉淀，取上清液于540nm处测定吸光度，检测出HbF的浓度。此试验也称为碱变性试验，其检测的是抗碱血红蛋白，除HbF外，HbBarts和部分HbH也具有抗碱能力，需通过电泳鉴别。
（2）抗碱血红蛋白测定参考值参考值：新生儿<40%，2岁以后至成人<2.5%。
（3）临床意义：珠蛋白生成障碍性贫血HbF增加，持续性胎儿血红蛋白症HbF高至100%。
某些疾病时HbF相对增加，包括恶性疾病如放射疗法后骨髓纤维化、恶性肿瘤骨髓转移、急性或慢性白血病、浆细胞瘤;非恶性疾病有再生障碍性贫血、纯红细胞再障、PNH、未治疗恶性贫血、卟啉病等。
【异丙醇沉淀试验】
原理：
不稳定血红蛋白较正常血红蛋白更容易裂解，在异丙醇这种能降低血红蛋白分子内部的氢键的非极性溶剂中，不稳定血红蛋白更快地沉淀。通过观察血红蛋白液在异丙醇中的沉淀现象对不稳定血红蛋白进行筛检。
结果：正常人血红蛋白液为阴性(30min内不沉淀)。
临床意义：不稳定血红蛋白(包括HbH)于5min时出现沉淀，20min内沉淀逐渐增加，甚至成絮状或粗颗粒状。血液中含有较多HbF、HbH、HbE时也可出现阳性结果。
【红细胞包涵体试验】
原理：将煌焦油蓝液与新鲜血液一起孵育，不稳定血红蛋白易变性沉淀形成包涵体。
结果：阴性。
临床意义：不稳定血红蛋白病、HbH病呈阳性。
【HbA2测定原理】
根据不同的血红蛋白带有不同的电荷，等电点不同，在一定的pH缓冲液中，缓冲液的pH大于Hb的等电点时其带负电荷，电泳时在电场中向阳极泳动，反之，Hb带正电荷向阴极泳动。经一定电压和时间的电泳，不同的血红蛋白所带电荷不同、相对分子质量不同，其泳动方向和速度不同，可分离出各自的区带，同时对电泳出的各区带进行电泳扫描，可进行各种血红蛋白的定量分析。
HbA2测定的参考值参考值：1.2%～3.5%。
临床意义：同血红蛋白电泳。
【细胞的兴奋性和生物电现象】
1.产生机制
（1）静息电位：内负外正，静K动Na
主要由K外流形成，接近K的电-化学平衡电位;
（2）动作电位：主要由Na内流形成，Na平衡电位根据Nernst公式计算的数值>实际测得的动作电位超射值。
特点：“全或无”现象;具有不应期。
动作电位产生机制：上升支(动Na---Na内流)、下降支(静K---K外流)、峰电位(失活不开放)、负后电位(K蓄积膜外)、正后电位(生电性钠泵作用结果)
2.极化、去极化、超级化、复极化和阈电位
去极化← →超级化 →复极化：-50~-70——-100
局部兴奋的特点：不是“全或无”的;
不能在膜上做远距离的传播(衰减性);
可以互相叠加(可以总和)。
3.兴奋性和阈值
兴奋性：可兴奋细胞受刺激后产生动作电位的能力，。
阈电位：是细胞去极化达到产生动作电位的临界膜电位数值，。
阈刺激：刚能引起组织发生兴奋的最小刺激，。
阈强度：引起组织发生兴奋的最小刺激强度，衡量组织兴奋性高低指标。
阈 值：引起动作电位的最小刺激强度，衡量细胞和组织兴奋性大小的最好指标。
分期：绝对不应期，相对不应期，超长期，低长期
4.兴奋在同一细胞上传到特点
（1）有髓神经纤维动作电位传导特点：跳跃性、节能。
（2）兴奋传导特点：双向性、绝缘性、安全性、不衰减性、相对不疲劳性、完整性。
5.骨骼肌的收缩功能
（1）骨骼肌的神经-肌肉接头：接头前膜、接头间隙和接头后膜(终板膜---乙酰胆碱受体)组成。
接头前膜------以量子形式释放Ach
（2）骨骼肌的神经传递：首先Ca2+内流，Ach(乙酰胆碱)外流。
（3）终板电位特点：具有局部电位的所有特征;不能引起肌肉的收缩;兴奋传递是一对一的。
（4）细胞间的传递特点：化学传递、单向传递、时间延搁、易受药物或其他环境因素变化影响。
（5）阻断Ach接头传递的：美洲箭毒、α-银环蛇毒。
（6）胆碱酯酶能------肌肉接头处消除Ach。
骨骼肌兴奋-收缩藕联：耦联因子--- Ca2+
